亲子鉴定原理

作者：鉴定张主任 发布时间：2017-03-29 00:00:00 人气：9

1、遗传特征的分析    
      遗传标记的概念(genetic marker)
2、妊娠期限的检查（280±14天）
3、性交及生育能力的鉴定
 
亲子鉴定的原理
方法：分析单基因遗传特征        
原理：所用的遗传标记遵守孟德尔遗传规律，即父母各把自己一半的DNA遗传给孩子，孩子分别带有一半父亲的DNA，一半母亲的DNA，孩子不可能带有父母没有的DNA。
 
判定父子关系的基本原理：    
  在肯定某个基因必须来自生父，而被控父亲并不具有这个基因的情况下，可以排除亲子关系；
  在肯定某个基因必须来自生父，而被控父亲具有这个基因的情况下，则不能排除其亲子关系；
                                                       ——父权概率
 
线粒体DNA多态性→母系单亲的亲子鉴定
Y 染色体DNA多态性→父系单亲的亲子鉴定
 
基因产物水平的遗传标记
一、红细胞血型
       指由等位基因决定的红细胞表面抗原的差异，为最早用于亲子鉴定的遗传标记，有ABO、MN、P、Rh等21个血型系统。
       简单遗传性状，符合孟德尔遗传规律
       遗传多态性，不易受年龄、性别、疾病影响
操作简单、重复性好，结果明确
二、红细胞酶型
       指红细胞多态性同工酶个体间的差异，如EAP、ESD、PGM1等
       方法：电泳分离＋酶谱技术  
三、血清蛋白型
       指由等位基因决定的人血清中同一种蛋白质的个体差异，又称血清型，如结合珠蛋白型，维生素D结合蛋白型，α1一抗胰蛋白酶型等。
       方法：电泳分离＋蛋白染色/免疫印迹技术。  
四、白细胞型
       指人类白细胞抗原(HLA)，又称移植抗原或组织相溶性抗原系统，包括A、B、C、D、DR、DQ、DP等基因产物,具有高度遗传多态性,是最复杂的人类遗传标记。
       方法：微是量淋巴细胞毒试验；混合淋巴细胞培养。
 
DNA水平的遗传标记
一、DNA的结构与功能
二、DNA多态性的分子学基础
（一）序列多态性
        指在两条同源染色体上，同源DNA序列长度相等，但个别核苷酸不同而产生的个体差异，也称单核苷酸多态性（SNP）。
（二）长度多态性
        指由于片段插入、缺失或重复序列数目变异所致的DNA片段长度的个体差异。
类型：散在重复序列
           串联重复序列、倒位重复序列
 
DNA多态性的检测技术
（一）DNA指纹（DNA fingerprint）技术
       将生物检材中细胞核的DNA分离出来，用特定的限制性内切酶消化，后经电泳分离，Southern印迹转移，再用已知序列小卫星DNA探针根据碱基互补原则进行杂交，用放射自显影等技术显示出一系列不等距离，相互间隔的多条电泳谱带组成的高度多态性图谱，实质为DNA的限制性片段长度多态性（RFLP）图像，因各人不同（同卵双生除外），比对结果类似指纹，故称DNA指纹图谱。
特点：
（1）体细胞稳定性
（2）个体高度特异性
（3）按孟德尔遗传规律遗传
（二）聚合酶链式反应（PCR）技术
       是依赖于靶DNA序列侧翼上所结合的两个寡核苷酸引物，在体外由DNA聚合酶催化合成特异性DNA片段的方法，又称体外基因扩增方法，目的是从生物体的整个基因组DNA中获取足够量的特异性片段，以供进一步分析。
特点：灵敏度高，特异性中，操作简单、快速。
PCR产物的类型及作用：
（1）扩增片段序列多态性
（2）扩增片段长度多态性（AMP-FLP）
        来自基因组DNA中小卫星或微卫星位点。
STR是应用最广泛的遗传标记系统
（1）基因位点多、多态性高,扩增片段短。
（2）扩增片段长度相差不大，利于进行多个STR位点的复合扩增。
（三）DNA芯片（DNA chip）技术
 
亲子鉴定结果的评估
一、排除亲权关系
       指分析受检者之间的遗传标记，发现不遵循遗传规律。
 1、只有1个遗传标记违背遗传规律，应加测其他系统;
 2、有2个遗传标记排除，应具体分析;
 3、有3个或以上遗传标记排除，可排除亲子关系;
二、肯定亲权关系
       指分析遗传标记未发现违背遗传规律，可能存在亲生关系；
根据下列指标肯定亲权关系：
 1、实验检测遗传标记的累积非父排除率≥99.95%；
 2、假定父亲的累积父权指数>2000，或在前概率相同条件下，假定父亲的相对父权机会≥99.95%。
 1、只有1个遗传标记违背遗传规律，应加测其他系统;
 2、有2个遗传标记排除，应具体分析;
 3、有3个或以上遗传标记排除，可排除亲子关系;
三、单亲亲子鉴定结果的评估
       指只有单亲参与亲子鉴定
方法：
 1、根据遗传标记是否违反遗传规律进行排除。若无法排除亲权关系，在亲子鉴定的各位点的累积非父排除率>0.9990，计算其父权概率≥0.9990，可肯定亲子关系。
 2、利用不能参与一方的直系亲属（父母、兄、妹）的DNA进行鉴定。

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